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    光復新聞

    TBS緩沖液的配制方法和用途

    發(fā)布日期:2021/08/25


     

    TBS是Tris-HCl緩沖鹽溶液(Tris Buffered,Saline)或緩沖生理鹽水, 屬于常規(guī)pH緩沖液,常用于清洗免疫染色的組織或Western Blot 中的蛋白印跡膜等,是常用分子生物學試劑。TBS緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)主要由Tris、氯化鈉、BSA、防腐劑等組成,可用于免疫金銀染色中清洗組織,也可作為封閉液的基礎試劑。

     

    TBS緩沖液配制方法是:先以重蒸水少許溶解NaCl(3.5~9g,0.15mol/L),再加0.5mol/L Tris-HCl緩沖液100mL,最后加重蒸水至1000ml,充分搖勻使Tris終濃度為0.05mol/L。TBS常用于免疫酶技術中漂洗標本,通常還搭配去污劑Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚,一種非離子型表面活性劑)一起使用。

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    1、Tris緩沖生理鹽水(Tris Buffered,Saline,TBS)

    試劑:0.5mol/L Tris-HCl緩沖液   100ml

    NaCl              3.5~9g(0.15mol/L)

    重蒸水              至1000ml

    配制:先以重蒸水少許溶解NaCl,再加Tris-HCl緩沖液,最后加重蒸水至1000ml,充分搖勻使Tris終濃度為0.05mol/L。

    TBS主要用于漂洗標本,常用于免疫酶技術中。

    2、Tris-TBS(PBS)

    試劑:Triton X-100         10ml(1%)或3ml(0.3%)

    0.5mol/L Tris緩沖液(pH7.6)  1000ml(50ml)或(0.2mol/L的PB)

    NaCl              8.5~9g
    ?
    重蒸水              至1000ml

    配制方法:先以重蒸水少許溶解NaCl后,加入Triton X-100及Tris緩沖液或(PB),最后加重蒸水至1000ml,充分搖勻。

    該液常用濃度為1%及0.3%,前者主要用于漂洗標本,后者主要用于稀釋血清。
     

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